СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ COVID-19: ОТ ИФА И ПЦР ДО ИНТЕРФЕРОНОВОГО СТАТУСА И D-ДИМЕРА

Стратегия борьбы с пандемией инфекции COVID-19 напрямую зависит от качества лабораторных методов исследования, а «золотым стандартом» диагностики COVID-19 были и остаются анализы на основе метода полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой (rRT-PCR или ОТ-ПЦР), позволяющие в реальном режиме времени определять компоненты РНК коронавируса [1,2].

К сожалению, ОТ-ПЦР требует наличия специализированной лаборатории и дорогостоящего оборудования. Но метод петлевой изотермальной амплификации (LAMP), также применяемый для детекции вирусной РНК, не требует лаборатории и может выполняться в формате «у постели больного». Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет определять вирус-специфические антитела, однако и этот метод требует лабораторного оборудования. А вот экспресс-тесты на основе метода иммунохроматографии на твердофазном носителе могут ответить на вопрос наличия иммуноглобулинов в течение 10-15 минут [3].

Сегодня молекулярная диагностика использует такие методы, как петлевая изотермическая амплификация с обратной транскрипцией (ОТ-LAMP) и амплификация рекомбинантной полимеразы обратной транскрипции (ОТ-PRA), а также технологии редактирования генома CRISPR/Cas для создания высоко-чувствительных тест-систем для детекции РНК коронавируса SARS-CoV-2 на основе методик DETECTR и SHERLOCK [4-6].

С целью определения степени тяжести больного и формирования исходов заболевания, в клинике исследуют уровни С-реактивного белка (СРБ) и прокальцитонина, изучают биомаркеры свертывания крови - активированного частичного тромбопластинового времени, протромбинового индекса, фибриногена, а также D-димера, повышенные титры которого являются плохим прогностическим критерием, связанным с тяжелыми осложнениями и даже гибелью пациента [8,9].

Важным лабораторным показателем является детекция уровня воспалительных цитокинов, таких как GCSF, IL-2, MCP1, IL-6, IL-7, IL-10, MIP1A, IP10 и TNFα [10].

И наконец, самый главный анализ – оценка интерферонового статуса (ИФН-статус). Дефицит основного противовирусного белка-интерферона коррелирует с тяжестью патологического процесса при инфекции COVID-19: у пациентов в тяжелом и критическом состоянии снижена экспрессия генов, кодирующих интерфероны I типа, и соответственно, подавлен синтез интерферонов. Низкий уровень интерферона-ɑ (ИНФ-α) в плазме крови ученые рассматривают как маркер, указывающий на риск развития критического состояния [11].

Таким образом, снижение продукции ИНФ-α говорит о дефектности системы интерферона и является показанием для ИФН-стимулирующей терапии, а оценка показателей ИФН-статуса позволяют судить об иммунореактивности организма в целом (12-16).

Безусловно, приведённые здесь методы лабораторной диагностики COVID-19 не являются исчерпывающими, в каждом конкретном случае спектр анализов может быть существенно расширен.